質(zhì)粒蛋白標(biāo)簽中的熒光蛋白

質(zhì)粒蛋白標(biāo)簽（protein tag）中的熒光蛋白

熒光蛋白在某種定義下可以說是革新了生物學(xué)研究——運(yùn)用熒光蛋白可以觀測到細(xì)胞的活動，可以標(biāo)記表達(dá)蛋白，可以進(jìn)行深入的蛋白質(zhì)組學(xué)實驗等等。特別是在癌癥研究的過程中，由于熒光蛋白的出現(xiàn)使得科學(xué)家們能夠觀測到腫瘤細(xì)胞的具體活動，比如腫瘤細(xì)胞的成長、入侵、轉(zhuǎn)移和新生。

綠色熒光蛋白(GreenFluorescent Protein，簡稱GFP )

在美國西北海岸所盛產(chǎn)的一種名為Aequorea victoria的水母中發(fā)現(xiàn)的一種可以發(fā)出綠色熒光的蛋白質(zhì)。GFP早是在1962年由日本科學(xué)家下村修發(fā)現(xiàn)，由238氨基酸組成的單體蛋白質(zhì)，蛋白分子約為27kD。

eGFP增強(qiáng)型綠色熒光蛋白

eGFP 標(biāo)簽蛋白，是增強(qiáng)型綠色熒光蛋白eGFP,激發(fā)波長為488nm，發(fā)射波長為507nm，其是由野生型綠色熒光蛋白GFP通過氨基酸突變和密碼子優(yōu)化而來的。相對于GFP，eGFP熒光強(qiáng)度更強(qiáng)、熒光性質(zhì)更穩(wěn)定。同時載體中構(gòu)建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)效率更高。不用破碎組織細(xì)胞和不加任何底物，直接通過熒光顯微鏡就能在活細(xì)胞中發(fā)出綠色熒光，實時顯示目的基因的表達(dá)情況，而且熒光性質(zhì)穩(wěn)定，被譽(yù)為活細(xì)胞探針。其自發(fā)熒光，不需用目的基因的抗體或原位雜交技術(shù)就可推知目的基因在細(xì)胞中的定位等情況。同時細(xì)胞內(nèi)的其它產(chǎn)物不會干擾標(biāo)簽蛋白檢測，從而使其檢測更顯得快速、簡便、靈敏度高而且重現(xiàn)性。其低消耗、高靈敏度檢測，十分適用于高通量的藥物篩選。

eYFP增強(qiáng)型黃綠色熒光蛋白

eYFP標(biāo)簽蛋白為增強(qiáng)型黃綠色熒光蛋白eYFP，激發(fā)波長為513nm，發(fā)射波長為527nm，其是由野生型黃綠色熒光蛋白YFP通過氨基酸突變和密碼子優(yōu)化而來的。

eCFP增強(qiáng)型青色熒光蛋白

eCFP標(biāo)簽蛋白為增強(qiáng)型青色熒光蛋白eCFP，激發(fā)波長為433nm或453nm，發(fā)射波長為475nm或501nm，其是由野生型青色熒光蛋白CFP通過氨基酸突變和密碼子優(yōu)化而來的。