NIGHTSEA熒光觀測(cè)裝置輕松觀測(cè)熒光

美國(guó)NIGHTSEA專(zhuān)門(mén)致力于研究和開(kāi)發(fā)熒光觀測(cè)裝備。NIGHTSEA熒光觀測(cè)利器包括：SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器，DFP-1雙熒光蛋白手電筒系列，BLS2單熒光蛋白手電筒系列等。

 小巧簡(jiǎn)便的熒光觀測(cè)裝置，應(yīng)用如下：
一 美國(guó)NIGHTSEA熒光觀測(cè)利器的應(yīng)用之——轉(zhuǎn)基因生物觀測(cè)：如小鼠幼崽，果蠅幼蟲(chóng)，線蟲(chóng)，斑馬魚(yú)，等等。
1. 觀測(cè)轉(zhuǎn)基因生物——果蠅

觀測(cè)轉(zhuǎn)基因生物——斑馬魚(yú)

3. 觀測(cè)轉(zhuǎn)基因生物——爪蟾

4. 觀測(cè)轉(zhuǎn)基因生物——線蟲(chóng)

5.觀測(cè)轉(zhuǎn)基因生物——蠑螈

6.觀測(cè)轉(zhuǎn)基因生物——擬南芥種子

美國(guó)NIGHTSEA熒光觀測(cè)利器的應(yīng)用之——樣本預(yù)篩選和輔助解剖

熒光是細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)及其它多個(gè)研究領(lǐng)域中一種強(qiáng)大和廣泛使用的工具。nightsea的DFP-1, BLS2和SFA-RB可以用于樣本的預(yù)篩選、輔助解剖等，下面列舉幾個(gè)實(shí)例：

1. 熒光蛋白標(biāo)記的工程病毒載體在神經(jīng)元功能研究中應(yīng)用十分廣泛，常通過(guò)顱內(nèi)注射研究特定腦區(qū)的功能。在此中，常需要對(duì)病毒表達(dá)區(qū)域進(jìn)行快速解剖用于特定的生化分析。為了提高快速解剖定位精準(zhǔn)度，研究人員選用了nightsea的BLS2 Bluestar手電筒觀測(cè)系列，通過(guò)配合nightsea濾光眼鏡準(zhǔn)確確定注射表達(dá)了熒光蛋白的伏核區(qū)(文獻(xiàn)– Xuan Li and Marina E. Wolf, 2011. Visualization of virus-infected brain regions using a GFP-illuminating flashlight enables accurate and rapid dissection for biochemical analysis. J. of Neuroscience Methods, Vol. 201, Issue 1, pp. 177-179. LINK) 

EGFP標(biāo)記的慢病毒質(zhì)粒注射進(jìn)小鼠大腦區(qū)域（Marina Wolf, Rosalind Franklin University）
 

2. 研究者從小鼠大腦中提取GFP標(biāo)記的背紋體。這項(xiàng)困難的工作因有了NIGHTSEA的DFP-1或BLS2（手電筒和眼鏡組合），而變得簡(jiǎn)單：很容易看到大腦中的目標(biāo)區(qū)域，從而讓解剖更準(zhǔn)確、。

小鼠大腦中GFP標(biāo)記的背紋體（Charles Mazel. Sample photographed at laboratory of Stefano Vicini, Georgetown University）

3. 用DFP-1雙熒光蛋白手電筒，BLS2單熒光蛋白手電筒，或SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器，可以很快的檢測(cè)樣本是否成功染色（Alexa Fluor 488 Phalloidin標(biāo)記），如下圖：

 
兔腰肌的肌纖維（用Alexa Fluor 488 Phalloidin標(biāo)記）

左圖：白光觀測(cè) 右圖：Royal Blue熒光觀測(cè)（Motic SMZ-186體視顯微鏡觀測(cè)）
 

4.用SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器以斑馬魚(yú)為模型，觀測(cè)不同有害化學(xué)物（醫(yī)藥、農(nóng)藥、食品添加劑等）對(duì)大腦發(fā)育的影響。觀測(cè)圖片如下：

基因斑馬魚(yú)大腦共聚焦圖像

Kaede protein–綠色是未改變的，紅色是發(fā)生改變的，圖片由Robert Thorn（Creton Lab, 布朗大學(xué)）提供
 

5. 熒光是珊瑚采集研究的重要工具?，F(xiàn)在，可以用經(jīng)濟(jì)又實(shí)惠的SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器安裝到體視顯微鏡上檢測(cè)珊瑚。

下面的圖片是通過(guò)立體顯微鏡觀看珊瑚蟲(chóng)，由UNCW威爾明頓納大學(xué)Alina Szmant 博士與NIGHTSEA Charles Mazel博士提供

 6. 用于結(jié)核分枝桿菌重組株的篩選

在結(jié)核分枝桿菌中成功構(gòu)建了高效同源重組系統(tǒng)，利用該系統(tǒng)構(gòu)建了rv1364c、pstP跨膜區(qū)、pstP胞外區(qū)三個(gè)突變株，得到雙交換突變株的效率為25％-62.5％，從雙交換突變株得到無(wú)痕缺失突變株的效率為100％。通過(guò)gfp作為熒光標(biāo)記基因，利用NightSea BlueStar藍(lán)光手電筒和濾光眼鏡,可以對(duì)平板上的基因缺失株直接進(jìn)行快速判定。

本研究采用nightsea BLS2 BlueStar 藍(lán)色手電筒和濾光鏡對(duì)平板上的結(jié)核分枝桿菌綠色熒光蛋白菌落進(jìn)行快速鑒定。該方法可以從幾百個(gè)菌落中瞬間鎖定陽(yáng)性克隆。平板上的菌落照片拍攝用單反相機(jī)加載購(gòu)自nightsea公司的濾光片實(shí)現(xiàn)。

 圖片源自[結(jié)核分枝桿菌同源重組基因敲除系統(tǒng)的構(gòu)建和應(yīng)用]

Good News標(biāo)準(zhǔn)的DFP-1雙熒光蛋白觀測(cè)鏡，只有RB-Royal Blue和GR-Green兩種熒光激發(fā)裝置，也就是說(shuō)標(biāo)準(zhǔn)的DFP-1只能用于觀測(cè)綠色熒光蛋白和紅色熒光蛋白。

現(xiàn)在，您可以選擇以下任何兩種熒光裝置，組裝成您專(zhuān)屬的雙熒光蛋白手電筒啦。

注：

1.RB-Royal Blue用于觀測(cè)綠色熒光蛋白

GFP：綠色熒光；EGFP：增強(qiáng)型綠色熒光；fluorescein熒光素

2.CY-Cyan用于觀測(cè)黃色熒光蛋白

YFP：黃色熒光蛋白；Venus：金色；Lucifer Yellow：熒光黃

3.GR-Green用于觀測(cè)紅色熒光蛋白

DsRed：紅色熒光蛋白；dTomato：番茄紅

4.VI-Violet用于觀測(cè)紫色熒光蛋白

CFP：青色熒光蛋白；BFP：堿性胎兒蛋白

5.UV-Ultra Violet用于觀測(cè)紫外光

DAPI：藍(lán)色熒光